Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中都逐渐扩展

从第一次浮现呼吸道自身血清到浮现1型号癌症流行病学呕吐的令人满意率在儿童初期就有很好的说明了，多个呼吸道自身血清形态性的儿童里面有70%在血清转换后10年内中风癌症，而随访15年的儿童这一%降低到84%。相对来说来说，占流行病学1型号癌症一半以上的型号1型号癌症的发病机制还很难得到充分的研究课题。

越来越多的人开始运用于分期系统来下定义1型号癌症的令人满意：生殖在浮现多种呼吸道自身血清时转到第1之前，浮现胰岛素间歇性时转到第2之前，浮现呕吐时转到第3之前。一些多发呼吸道自身血清形态性的生殖，在1期和2期，令人满意较更是慢，并转变为发病的1型号癌症。我们在此之前说明了了一四组在首次探测到多种呼吸道自身血清样本后至寡10年无癌症的正因如此更是慢令人满意者，这四组病患人数寡，但形态非常明确。随后，我们发现呼吸道自身抗原特异性CD8+T肝细胞底物在令人满意平稳的病患里面前提不假定，但在早先发病和长期假定的癌症病患里面很容易探测到。这似乎暗示，与令人满意病患相比，这些病患化脓性底物的调节大幅提高。

以前研究课题暗示，尽管调节性T肝细胞(Treg)存量但会，但癌症病患假定一些系统缺陷，其里面包含对IL-2的底物潜能减寡。此外，癌症病患里面的现像CD4+T肝细胞似乎对调节更是具抵抗性，表现为现像T肝细胞的抑制作用减更是慢，纯净造成了的Treg和纤外造成了的诱发Treg，以及抗原经历的CD4+T肝细胞里面IL-2底物减更是慢。本研究课题的借此是说明了了CD4+调节性T肝细胞(Treg)在一小群正因如此平稳令人满意者里面的形态，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方法：BOX研究课题是一项以人群相结合的纵向研究课题，在21岁表列确诊的病患亲属里面探测1型号癌症的致命因素所。我们在此之前说明了了长期平稳令人满意者的形态，他们保持多重呼吸道自身血清形态性超过10年，但很难浮现癌症的流行病学呕吐，更是慢性或非顺利完成性化脓性。随后，10名继续保持无癌症并愿意获取大量血浆样本的平稳令人满意者纳入T和B肝细胞系统比对。在在此之前的研究课题里面，8名更是慢令人满意者(SP四组)，里面位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁之间的呼吸道自身血清形态性。所有的行动者都属于1型号癌症令人满意的1期，尽管一些人随后失去了呼吸道自身血清对某些抗原的形态性底物，然而，一名病患不太似乎属于2期至寡6年，但很难浮现流行病学呕吐，一名病患被诊断为癌症，该受试者72岁，在挖掘出实验室样本时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据比对里面对该酪氨酸顺利完成了单独评估。分立外周血单个核子肝细胞(PBMCs)，采用多参数流式肝细胞奥义和T肝细胞抑制作用试验评估酪氨酸里面Treg的频谱、遗传和系统。运用于FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、相关联和回归)顺利完成无督导聚类比对，评估Treg遗传。

结果：与身体健康酪氨酸相比，来自更是慢令人满意纤的遗忘CD4+T肝细胞的督导聚类推测，激来生的遗忘CD4+ Treg频谱降低，与糖皮质激素诱发的TNFR关的蛋白(GITR)表述降低有关。一名HbA1c升高的病患与令人满意平稳者和匹配的相异四组相比，Treg谱各不相同。系统比对暗示，与身体健康酪氨酸相比，来自平稳令人满意纤的Treg抑制作用的CD4+现像T肝细胞抑制作用明显受损。表现为对现像CD4+T肝细胞CD25和CD134表述的抑制作用降低。

平面图1 深入的遗传比对推测，CD4+Treg亚型号在更是慢令人满意数据流里面降低。由FlowSOM生成的Treg室，聚集在来自所有酪氨酸的来生CD4+CD45RA -肝细胞上。根据上面物表述鉴定借助于10个元簇:遗忘T肝细胞_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;遗忘T cell_4;CD49b遗忘T肝细胞;HLA-DR + GITR +遗忘T肝细胞;闪存Treg_1;闪存Treg_2;闪存Treg_3;和闪存Treg_4。(a)运用于9个不同Treg上面生成的10个元簇的MST。每个路由代表一个集群(100个集群)，非常大的元集群(10个元集群)在路由四组周围着色。每个路由里面的饼平面图说明单个上面的表述级别。(b)每个元聚类的热平面图，以推测整纤上面表述。(c, d)为HD四组(c)和SP四组(d)生成平面图，以及FlowSOM标识的每个元簇的很薄。(e-l)相对来说存量级为每个metacluster装有两条路线平面图(存量级> 0.05%)确认为HD和SP四组:闪存Treg_2 (e),闪存Treg_3 (f),闪存Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +遗忘T肝细胞(h)、遗忘T cell_1(i),遗忘T cell_2 (j),遗忘T cell_3 (k) n d CD49b遗忘T肝细胞(l)。蓝色白点代表捐**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验。此键适用于平面图形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

平面图2 运用于CITRUS的估测号证实，Treg频谱的降低是令人满意平稳的标志。分级离叔父通道(a - f)和柑橘比对(g-k)比较SP行动者和匹配的HD行动者在CD4+CD45RA−T肝细胞上的差异。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l社会群纤的代表性平面图。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR表述顺利完成分立，虚拟FlowSOM社会群纤。(b) HD(黑点)和SP(杂色)四组以及酪氨酸SP 606(蓝色)里面CD25+ cd127的频谱综合平面图。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+离叔父通道叔父集的装有两条路线平面图;(c) HLA-DRloGITR−(闪存Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(闪存Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(闪存Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+闪存T cell)。(g - i)柑桔簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3表述强度着色，上标突借助于的簇被标识为SP和HD数据流之间的不同。(j)装有两条路线平面图推测了在SP(杂色)和HD(灰点)四组里面，CITRUS遗忘Treg_3和Treg_4的相对来说存量级(%)。(k)直方平面图推测每个簇的遗传(黄色)和Treg上面相对来说表述与时代背景表述(白色);上列，闪存Treg_3;下面一路上，闪存Treg_4。时代背景与所有其他簇里面上面的表述有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验

平面图3 与身体健康献血者相比，令人满意平稳者遗忘treg的GITR降低。每个遗忘CD4+T肝细胞元簇(遗忘T肝细胞_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;CD49b +遗忘T肝细胞;HLA-DR + GITR +遗忘T肝细胞;闪存Treg_2;闪存Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)探测每个表述上面的推移。(a,b)来自HD (a)和S (b)数据流的表述热平面图(sp606不包含在内)。(c,d)遗忘Treg_4元簇里面所有HD(黄褐色)、所有SP(白色)和SP 606(蓝色)的FlowSOM GITR表述串接，推测直方平面图(c)和综合平面图(d)。Wilcoxon配对符号秩和检验，p< 0.07(蓝色)所有酪氨酸包含，p< 0.05(白色)酪氨酸SP 606和匹配的HD不包含在测试里面。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs里面GITR表述，从分级离叔父通道，从所有HD(黄褐色)、所有SP(白色)和SP 606(蓝色)串接，推测直方平面图(e)和综合平面图(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对符号秩检验

平面图4 来自平稳令人满意的CD4+ treg肝细胞控制现像CD4+T肝细胞的潜能减寡。SP四组用白色的两条路线和白点说明，HD四组用蓝色的两条路线和白点说明，蓝色的两条路线/白点说明酪氨酸sp606。运用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T肝细胞顺利完成分选。CD4+CD25−(；也者)被上面为CFSE, Treg按捕捉到的%滴定。用抗CD3 /28微珠重置肝细胞，培养借助于来3过后顺利完成流式肝细胞奥义探测。(a-d)与CD4+；也者相对来说其所的treg培养借助于来(自纤)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD；也者培养借助于来。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE抑制作用多于(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的抑制作用多于。运用于形态性相异(激来生的响其所肝细胞内含treg)近似值抑制作用多于。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差比对。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

平面图5 现像CD4+T肝细胞对平稳令人满意的T肝细胞重置的抑制作用更是敏感。SP四组用白色的两条路线和白点说明，HD四组用蓝色的两条路线和白点说明，蓝色的两条路线/白点说明酪氨酸sp606。运用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T肝细胞顺利完成分选。CD4+CD25−(；也者)被cfsel上面，treg按捕捉到的%滴定。用抗CD3 /28微珠重置肝细胞，培养借助于来3过后顺利完成流式肝细胞奥义(CD25反染)和肝细胞因叔父比对。HD Treg与HD、SP或sp606；也者协同培养借助于来。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE抑制作用次之(b)。(c,d) CD25抑制作用次之(c)和CD134抑制作用次之(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培养借助于来里面的表述。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差比对。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

事实：我们算借助于的事实是，来自平稳令人满意叔父的重置遗忘CD4+Treg在GITR表述里面得到了扩展和多样化，合理化了进一步研究课题Treg在1型号癌症风险生殖里面的系统性的必要性。

原文借助于处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28